Отримання та характеристика клітинних ліній MCF-7 з різною експресією ERα з використанням технології CRISPR/Cas9
Тип публікації :
Бакалаврська робота
Дата випуску :
2026
Автор(и) :
Квітченко, Софія
ННЦ "Інститут біології та медицини"
Науковий(і) керівник(и)/редактор(и) :
Мова основного тексту :
Ukrainian
eKNUTSHIR URL :
Цитування :
[APA 7] Квітченко, С. (2026). Отримання та характеристика клітинних ліній MCF-7 з різною експресією ERα з використанням технології CRISPR/Cas9 [Бакалаврська робота, Київський національний університет імені Тараса Шевченка]. eKNUTSHIR. https://ir.library.knu.ua/handle/15071834/29918
[ДСТУ] Квітченко С. Отримання та характеристика клітинних ліній MCF-7 з різною експресією ERα з використанням технології CRISPR/Cas9 : кваліфікаційна робота бакалавра : G21 Біотехнології та біоінженерія / наук. кер. Н. С. Нікітіна. Київ, 2026. 59 с. URL: https://ir.library.knu.ua/handle/15071834/29918 (дата звернення: 12.08.2026).
У кваліфікаційній роботі із застосуванням технології CRISPR/Cas9 створено клітинні сублінії карциноми молочної залози MCF-7 з модифікованою експресією ізоформ естрогенового рецептора альфа (ERα). Метою роботи було отримання та характеристика субліній MCF-7 з різною експресією ізоформ ERα для з'ясування ролі окремих ізоформ у регуляції ERα-залежного сигналінгу, епітеліально-мезенхімального переходу та функціональних властивостей клітин.
Об'єктом дослідження були CRISPR/Cas9-модифіковані сублінії MCF-7 з повним (MCF-7/9) та частковим (MCF-7/12) блокуванням ізоформи ERα-66. Для характеристики субліній використовували вестерн-блот аналіз, кількісну ПЛР у реальному часі, МТТ-тест, ресазуриновий тест проліферативної активності та тест ранової поверхні для оцінки міграційної здатності клітин.
Встановлено, що повне блокування ERα-66 супроводжується компенсаторною надекспресією ізоформи ERα-46 та значним зниженням експресії S6K1 на рівні мРНК і білка, що підтверджує роль ERα як транскрипційного фактора для S6K1. Показано, що блокування ERα-66 не призводить до ініціації ЕМТ, що свідчить про можливу участь інших ізоформ ERα у регуляції цього процесу. Виявлено зміну динаміки фосфорилювання компонентів шляху mTOR/S6K1 за умов метаболічного стресу, зниження метаболічної активності та підвищення стресостійкості клітин з повним блокуванням ERα-66. Обидві сублінії демонстрували зниження швидкості міграції, та тенденцію до уповільнення проліферації.
Кваліфікаційна робота викладена на 59 сторінках, ілюстрована 13 рисунками та містить 2 таблиці. Список використаних джерел включає 51 найменування.
Об'єктом дослідження були CRISPR/Cas9-модифіковані сублінії MCF-7 з повним (MCF-7/9) та частковим (MCF-7/12) блокуванням ізоформи ERα-66. Для характеристики субліній використовували вестерн-блот аналіз, кількісну ПЛР у реальному часі, МТТ-тест, ресазуриновий тест проліферативної активності та тест ранової поверхні для оцінки міграційної здатності клітин.
Встановлено, що повне блокування ERα-66 супроводжується компенсаторною надекспресією ізоформи ERα-46 та значним зниженням експресії S6K1 на рівні мРНК і білка, що підтверджує роль ERα як транскрипційного фактора для S6K1. Показано, що блокування ERα-66 не призводить до ініціації ЕМТ, що свідчить про можливу участь інших ізоформ ERα у регуляції цього процесу. Виявлено зміну динаміки фосфорилювання компонентів шляху mTOR/S6K1 за умов метаболічного стресу, зниження метаболічної активності та підвищення стресостійкості клітин з повним блокуванням ERα-66. Обидві сублінії демонстрували зниження швидкості міграції, та тенденцію до уповільнення проліферації.
Кваліфікаційна робота викладена на 59 сторінках, ілюстрована 13 рисунками та містить 2 таблиці. Список використаних джерел включає 51 найменування.
Галузі знань та спеціальності :
G21 Біотехнології та біоінженерія
Файл(и) :![Ескіз]()
Вантажиться...
Формат :
Adobe PDF
Розмір :
877.79 KB
Контрольна сума :
(MD5):3d5d53b6021eb6a5b3b9bfade37aa4e3