Stupak, I., Gorbach, O., Sckachkova, O., Senchylo, N., Singayivskiy, E., Starshinova, M., Garmanchuk, L. (2022). The expression of TLR4, IFN-γ, TGF-β and TNF-α in the cell line of human small cell lung carcinoma NCI-H69 and in cisplatinresistant subline NCI-H69/CPR. Biotechnologia Acta, 15 (6), 55-60.

Aim: to investigate the effect of teichoic acid Staphylococcus aureus for expression of pro-inflammatory cytokines and of TLR4 in a human small cell lung carcinoma cell line NCI-H69, and cisplatin resistant subline NCI-H69/CPR.
Methods. Incubation of cells with teichoic acid (1 ng/m) conducted for 2 days. Expression level of TLR4, TGF-β, INF-γ, TNF-α was evaluated by the real time PCR on 7500 Real-Time PCR System, using specific primers and fluorochrome SYBR Green. The reverse transcription reaction was performed with High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit carried out under the conditions: 25 °C - 10 min, 37 °C ‒ 120 min and 85 °C ‒ 5 min.
Results. In cell line culture NCI-H69 addition of teichoic acid increased expression of TLR4 by 1.3 times, and IFN-γ – by 1,1 times. Expression of TGF-β and TNF-α was decreased 2.5 and 4.9 times respectively. In cell line culture NCI-H69/CPR the addition of teichoic acid inhibited the expression of all studied parameters. Expression TLR4 decreased by 4.2 times, IFN-γ – by 1.4 times. Expression TGF-β and TNF-α was depressed 1.6 and 1.2 times. The presented data indicate that teichoic acid of bacterial origin provided the effect of modulating the inflammatory effect in lung cancer cell culture, sensitive and resistant to cisplatin.
Conclusions. Teichoic acid as a ligand of TLR4 modulates the expression of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in small cell lung cancer cell culture and suppresses the expression of TLR4 and all investigated cytokines in the cisplatin-resistant cell line NCI-H69.

Мета. Дослідити вплив тейхоєвої кислоти Staphylococcus aureus на експресію прозапальних цитокінів і TLR4 у клітинній лінії NCI-H69 дрібноклітинної карциноми легенів людини та резистентній до цисплатину сублінії NCI-H69/CPR.
Методи. Інкубацію клітин з тейхоєвою кислотою (1 нг/мл) проводили протягом 2 діб. Рівень експресії TLR-4, TGF-, INF-, TNF- оцінювали методом ПЛР у реальному часі на 7500 Real-Time PCR System, використовуючи специфічні праймери та флуорохром SYBR Green. Реакцію зворотної транскрипції проводили за допомогою High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit за таких умов: 25 °C — 10 хвилин, 37 °C — 120 хвилин і 85 °C — 5 хвилин.
Результати. У культурі клітинної лінії NCI-H69 додавання тейхоєвої кислоти підвищувало експресію TLR4 у 1,3 рази, а IFN-γ — у 1,1 рази. Експресія TGF-β і TNF-α була знижена в 2,5 і 4,9 рази відповідно. У культурі клітинної лінії NCI-H69/CPR додавання тейхоєвої кислоти пригнічувало експресію всіх досліджуваних параметрів. Експресія TLR4 знижувалася в 4,2 рази, IFN-γ — в 1,4 рази. Експресія TGF-β і TNF-α була знижена в 1,6 і 1,2 рази. Наведені дані свідчать про те, що
тейхоєва кислота бактеріального походження забезпечила ефект модуляції запального ефекту в
культурі клітин раку легенів, чутливих і стійких до цисплатину.
Висновки. Тейхоєва кислота як ліганд TLR4 модулює експресію прозапальних і протизапальних
цитокінів у культурі клітин дрібноклітинного раку легенів і пригнічує експресію TLR4 і всіх
досліджених цитокінів у стійкій до цисплатину клітинній лінії NCI-H69.