ВТОРИННИЙ РІСТ У ДИХАЛЬНО-ДЕФІЦИТНОМУ ШТАМІ ДРІЖДЖІВ SACCHAROMYCES CEREVISIAE ВНАСЛІДОК ДЕЛЕЦІЇ ГЕНА YKU70

РИМАР, Ю., РУШКОВСЬКИЙ, С., ДЕМИДОВ, С., ВЕЛИКОЖОН, Л., ПРОНІНА, О., МОРГУН, Б. (2020). ADAPTIVE REGROWTH IN RESPIRATORY DEFICIENT STRAIN OF YEAST SACCHAROMYCES CEREVISIAE DUE TO DELETION OF YKU70 GENE. Вісник Київського національного університету імені Тараса Шевченка. Біологія, 82(3), 53–58. https://doi.org/10.17721/1728_2748.2020.82.53-58

Відомо, що вагомими причинами розвитку злоякісних пухлин є дестабілізація ядерного геному та порушення функціонування мітохондрій. Виникнення вторинного росту на колоніях дріжджів (поява більш пристосованих до несприятливих умов клітинних субпопуляцій в умовах загибелі вихідної культури) використовують як модель початкових етапів канцерогенезу. Для вивчення особливостей формування адаптивного росту було створено репараційно-дефектний і дихально-дефіцитний штам дріжджів Saccharomyces cerevisiae. Як індуктор нестабільності ядерного геному застосовано термочутливу мутацію в гені yku70 (при 37 оС викликає зупинку клітинного циклу внаслідок скорочення довжини теломерних ділянок хромосом). Пошкодження мітохондріальної ДНК ∆yku70 штаму призвело до його дихально-дефіцитного стану (петіт мутація). Виділений петіт мутант ∆yku70 штаму культивували за оптимальної 28 оС та рестриктивної 37 оС температур, стан клітинної суспензії оцінювали за допомогою світлової та люмінесцентної мікроскопії, для визначення життєздатності клітин використовували аналіз росту мікроколоній. Проведено виділення клонів вторинного росту та аналіз їх властивостей методом серійних розведень. Для оцінювання стабільності дріжджового геному виділених клонів вторинного росту використано ПЦР-аналіз мікросателітних послідовностей YOR267C, SC8132X, SCPTSY7. При культивуванні петіт мутанта штаму ∆yku70 при рестриктивній температурі 37 оС на 7-му добу виявлено утворення життєздатних субпопуляцій, які можуть здолати зупинку клітинного циклу в G2/M фазі. Подальший аналіз виділених клонів вторинного росту показав, що вони відрізняються за виживаністю клітин при рестриктивній температурі, стійкостю до УФ випромінювання та здатністю до утворення вторинного росту на колоніях. За аналізу мікросателітних повторів у клонів вторинного росту не виявлено проявів нестабільності досліджуваних послідовностей.