Впровадження та оптимізація протоколів заморожування сперми райдужної форелі (Oncorhynchus mykiss, Walbaum) з особливим акцентом на вплив розмороженого молочка на успішність запліднення ікри

Голуб Е. О. Впровадження та оптимізація протоколів заморожування сперми райдужної форелі (Oncorhynchus mykiss, Walbaum) з особливим акцентом на вплив розмороженого молочка на успішність запліднення ікри : випускна кваліфікаційна робота магістра : 162 Біотехнології та біоінженерія / наук. кер. О. Ю. Нипорко, Е. Сегре. Київ, 2024. 77 с.

Представлено результати порівняльного аналізу свіжого та кріоконсервованого молочка райдужної форелі (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792) з фермерського господарства Viviers de Sarrance, що знаходиться у муніципалітеті Сарранс, Атлантичні Піренеї, Нова Аквітанія, Франція, та дослідження впливу різних концентрацій сперматозоїдів на успішність запліднення з метою оцінки біотехнологічного потенціалу використання кріоконсервованого молочка та доцільності впровадження його використання у виробничих протоколах. Проведено порівняльний аналіз концентрації та рухливості сперматозоїдів до та після кріоконсервації; показників запліднення, виживання на стадії вічка та вилуплення ікри, заплідненої свіжим або розмороженим молочком; виявлення впливу різних концентрацій на успішність запліднення (порівняння показників успішності запліднення, виживання на стадії вічка та вилуплення); дослідження можливості використання кріоконсервованого молочка у виробничих протоколах, що, як відомо, дозволяє оптимізувати використання кількості молочка форелі, мати молочко належної якості на виробництві незалежно від сезону та використовувати його в рамках програм селекції та розмноження. Отримані результати можуть бути використані для подальших досліджень, спрямованих на підтвердження ефективності протоколів, використаних у дослідженні, у великомасштабному виробництві та пошуках оптимальної концентрації для запліднення ікри без шкоди для рівня успішності запліднення ікри.
Проведені експерименти включали такі етапи: вилучення статевих залоз, екстракція молочка, визначення концентрації сперми та рухливості сперматозоїдів, розведення сперми до цільової концентрації, кріоконсервація, запліднення ікри, тест на успішність запліднення та відслідковування смертності 3 рази на тиждень з усуненням мертвих ікринок.
Проаналізовано концентрацію та рухливість сперматозоїдів, рівень успішності запліднення, виживання на стадії вічка та вилуплення. Встановлено, що нові протоколи запліднення для форелі є більш ефективними, ніж ті, що описані в літературі, адже ті не були адаптовані для форелі. Не було виявлено відмінності в успішності запліднення ікри свіжим та кріоконсервованим молочком. Коли сперматозоїди заморожуються, а потім розморожуються, спостерігається зменшення рухливості, однак нижча рухливість кріоконсервованої сперми жодним чином не впливає на високу успішність запліднення. Концентрації від 1,5 до 3 мільйонів сперматозоїдів на яйцеклітину показали найкращі результати запліднення. Рівень виживання при вилупленні був вищим за 80% у кожному зразку.
Отже, кріоконсервацію молочка форелі можна оцінити як ефективний метод біотехнологічного застосування у виробництві та рекомендувати проведення подальших досліджень для підтвердження ефективності використаних протоколів у широкомасштабному виробництві з подальшим вибором оптимальної концентрації сперми, адже результати є дуже обнадійливими для впровадження у виробничі протоколи.