Верховець Єлизавета ОлександрівнаВойтешенко, Іван Сергійович2024-08-222024-08-222024Верховець Є. О. Створення плазмідних конструктів для нокауту та нокіну гена гіпокальцина в первинній культурі нейронів гіпокампа : кваліфікаційна робота бакалавра : 091 Біологія та біохімія / наук. кер. І. С. Войтешенко. Київ, 2024. 62 с.https://ir.library.knu.ua/handle/15071834/4231Однією з головних проблем під час дослідження сигналізації гіпокальцина з мутаціями, що асоційовані з первинною дистонією, є низька експресія екзогенного білка, порівняно з відповідним ендогенним. Для розв'язання цієї проблеми необхідно нокаутувати ген гіпокальцина клітинах, що досліджуються. Але використання первинної культури нейронів вимагає контрольованого нокауту, що дозволятиме одразу оцінити успішність нокаутування ендогенного білка. У роботі було детально досліджено білок гіпокальцин, його функції й структуру, проаналізовано методи редагування геному на основі технології CRISPR/Cas9 та методи молекулярного клонування. У ході дослідження було створено плазмідні конструкти для контрольованого нокауту гіпокальцина. Вектори, створені в результаті виконання дипломної роботи, будуть використані для подальших нейрофізіологічних досліджень, що спрямовані на вивчення функцій гіпокальцина.One of the main problems in the study of hyppocalcin signalling with mutations associated with primary dystonia is the low expression of exogenous protein compared to the corresponding endogenous protein. To solve this problem, it is necessary to knockout the hyppocalcin gene in the cells. However, the use of primary neuronal culture requires a controlled knockout, which allows us to immediately assess the success of knocking out the endogenous protein. We studied the hyppocalcin protein, its functions and structure, analyzed genome editing methods based on CRISPR/Cas9 technology and molecular cloning methods. In our research, we created plasmid constructs for controlled knockout of hyppocalcin. The vectors created during our research will be used for further neurophysiological studies to study the functions of hyppocalcin.uaгіпокальцинпервинна дистоніяредагування геномуплазмідні векторимолекулярне клонуванняhyppocalcinprimary dystoniagenome editingplasmid vectorsmolecular cloningСтворення плазмідних конструктів для нокауту та нокіну гена гіпокальцина в первинній культурі нейронів гіпокампаConstruction of plasmid vectors for knockout and knock-in of the hyppocalcin gene in primary hippocampal neuronal cultureБакалаврська робота